Amidase (AMD)
Enzymer:Sinn makromolekular biologesch Katalysatoren, déi meescht Enzyme si Proteinen
Amidase:Katalyséiert d'Hydrolyse vu verschiddenen endogenen an auslänneschen aliphateschen an aromateschen Amiden andeems eng Acylgrupp an d'Waasser transferéiert gëtt, wouduerch fräi Säure an Ammoniak produzéiert ginn. Hydroxamsäuren an aner organesch Säure gi wäit verbreet als Medikamenter benotzt, well se Bestanddeeler vu Wuestumsfaktoren, Antibiotike an Tumorinhibitoren sinn. D'Amidasen kënnen an R-Typ an S-Typ Acylasen opgedeelt ginn, jee no der Stereoselektivitéit vum Katalysator.
Nieft der Katalyséierung vun der Hydrolyse vun Amiden kann Amidase och Acyltransferreaktiounen a Präsenz vu Kosubstrater wéi Hydroxylamin katalyséieren.
Amidase mat verschiddene Quellen hunn ënnerschiddlech Substratspezifizitéiten, e puer vun hinne kënnen nëmmen aromatesch Amiden hydrolyséieren, anerer nëmmen aliphatesch Amiden hydrolyséieren, an e puer hydrolyséieren α- oder ω-Aminoamiden. Déi meescht Amine hunn eng gutt katalytesch Aktivitéit nëmme fir azyklesch oder einfach aromatesch Amiden, awer fir komplex Aromaten hunn heterozyklesch Amiden, besonnesch Amiden mat ortho-Substituenten, am Allgemengen eng niddreg Aktivitéit (nëmmen e puer Enzyme weisen besser katalytesch Effekter).
Katalytesche Mechanismus:
| Enzymer | Produktcode | Produktcode |
| Enzympulver | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | e Set vun 19 Amidasen, 50 mg all 19 Stéck * 50 mg / Stéck, oder aner Quantitéit |
| Screening-Kit (SynKit) | ES-AMD-1900 | e Set vun 19 Amidasen, 1 mg all 19 Stéck * 1 mg / Stéck |
★ Héich Substratspezifizitéit.
★ Staark chiral Selektivitéit.
★ Héich Konversiounseffizienz.
★ Manner Nieweprodukter.
★ Liicht Reaktiounsbedéngungen.
★ Ëmweltfrëndlech.
➢ En Enzymscreening soll wéinst der Substratspezifizitéit fir spezifesch Substrater duerchgefouert ginn, fir en Enzym ze fannen, deen den Zilsubstrat mat der beschter katalytescher Wierkung katalyséiert.
➢ Ni a Kontakt mat extremen Bedéngungen, wéi z. B. héijer Temperatur, héijen/niddregen pH-Wäert an organescht Léisungsmëttel mat héijer Konzentratioun.
➢ Normalerweis soll de Reaktiounssystem e Substrat an eng Pufferléisung enthalen (den optimale Reaktiouns-pH-Wäert vum Enzym). Co-Substrater wéi Hydroxylamin sollten am Acyltransfer-Reaktiounssystem präsent sinn.
➢ AMD soll als lescht an de Reaktiounssystem mat optimalem Reaktiouns-pH-Wäert an Temperatur bäigefüügt ginn.
➢ All Zorte vun AMD hunn ënnerschiddlech optimal Reaktiounsbedéngungen, dofir sollt all eenzel weider ënnersicht ginn.
Beispill 1(1):
Hydrolyseaktivitéit zu verschiddenen Amidsubstrater
| Substrat | Spezifesch Aktivitéit μmol min-1mg-1 | Substrat | Spezifesch Aktivitéit μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3.8 | ο-OH Benzamid | 1.4 |
| Propionamid | 3.9 | p-OH Benzamid | 1.2 |
| Laktamid | 12.8 | ο-NH2Benzamid | 1.0 |
| Butyramid | 11.9 | p-NH2Benzamid | 0,8 |
| Isobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
| Pentanamid | 22.0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexanamid | 6.4 | Nikotinamid | 1.7 |
| Cyclohexanamid | 19,5 | Isonicotinamid | 1.8 |
| Acrylamid | 10.2 | Picolinamid | 2.1 |
| Metacrylamid | 3.5 | 3-Phenylpropionamid | 7.6 |
| Prolinamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| Benzamid | 6.8 |
D'Reaktioun gouf an enger 50 mM Natriumphosphat-Pufferléisung, pH 7,5, bei 70 ℃ duerchgefouert.
| Amiden | Hydroxylamin | Hydrazin |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| Propionamid | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramid | 25,0 | 22,7 |
| Benzamid | 9.2 | 6.1 |
D'Reaktioun gouf an enger 50 mM Natriumphosphat-Pufferléisung, pH 7,5, bei 70 ℃ duerchgefouert.
Verwandte Reagenzkonzentratioun: Amiden, 100 mM (Benzamid, 10 mM); Hydroxylamin an Hydrazin, 400 mM; Enzym 0,9 μM.
Beispill 2(2):
Beispill 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Prozessbiochemie, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Bioorganic Chemistry, 2017, Online verfügbar 7.
